Контакты

Методы определения количества ретикулоцитов клиническое значение. Ретикулоциты как считать. Ложный и истинный ретикулоцитоз

Ретикулоциты, норма которых различается в связи с множеством факторов, являются несформированными формами эритроцитов, а обнаружить их можно в составе костного мозга и периферической крови. Как правило, ретикулоциты в крови созревают за три-пять дней, а затем данные клетки превращаются в уже зрелые эритроциты. Причем количество несформированных эритроцитов существенно больше, чем у взрослых людей.

Выявление ретикулоцитов :

Выявляя ретикулоциты, норма которых определяется при помощи специальной таблицы, нужно учитывать их отличия от зрелых эритроцитов. В данной разновидности клеток крови либо содержится цельное ядро, либо его остатки наблюдаются в составе зернисто-нитчатой субстанции. Чтобы выявить количество таких клеток, необходимо изучить окраску мазка крови в лабораторных условиях. Для этого применяется синий бриллиантовый раствор, который наносится на обезжиренное и предварительно вымытое стекло, и уже затем делается мазок.

Когда выявляются ретикулоциты, норма которых различна, сразу после мазка используемое стекло следует поместить в чашку Петри - специальную влажную камеру, затем выдержать пять минут, тщательно высушить на свежем воздухе, а потом - микроскопировать. Причем субстанция зернисто-нитчатого типа внутри ретикулоцита обычно окрашивается в фиолетово-синий оттенок, а фон эритроцитов выделяется благодаря голубовато-зеленому оттенку.

Если применяется метод Гель-Мейера, окраску несозревших клеток крови можно разглядеть гораздо лучше, но для этого требуется пробирка Видаля. В данном сосуде пара капель крови смешивается с бриллиантовым раствором и хлоридом натрия, потом пробирка закрывается крышкой, а сам мазок выполняется уже через час.

Подсчет ретикулоцитов :

Рассчитывая количество несозревших клеток крови, нужно взять за основу 1000 эритроцитов, а затем рассмотреть ретикулоциты, норма которых обычно варьируется на уровне 0,2%-1,2% от количества взрослых эритроцитов. В среднем, у большинства людей число несозревших эритроцитов обычно составляет 0,7% от общего числа полностью созревших клеток крови. Если количество ретикулоцитов выше предельно допустимой нормы на 10% и больше, у человека возникает ретикулоцитоз - заболевание, сопровождающееся регулярными острыми кровотечениями и гемолитическими анемиями.

Подсчитывая ретикулоциты (норма у детей обычно высокая), стоит смотреть, чтобы их число не превысило предельные значения, характерные для взрослых. Нормативы зависят и от пола, поскольку у женщин 2,07% незрелых эритроцитов еще считается допустимым параметром, а у мужчин данный показатель не должен превышать 1,92%.

В случаях, когда уровень ретикулоцитов существенно повышен, это свидетельствует о наличии таких нарушений в организме, как малярия и талассемия, полицитемия и гипоксия, анемия, всевозможные гемолитические синдромы, но такие показатели возможны и при лечении цианкобаламином. Если уровень незрелых эритроцитов понижен, у человека может наблюдаться апластическая и гипопластическая анемия, всевозможные заболевания почек и микседема, а также распространение на кости метастазов опухолей.

Чтобы диагностировать тяжесть анемии, необходим расчет «ретикулоцитарного индекса», который рассчитывается как соотношение процента ретикулоцитов и нормальных значений гематокрита, помноженных на число суток, необходимых для поступления несозревших клеток в периферическую кровь. Если полученный индекс не превышает двойки, показатель свидетельствует о гипопролиферативном компоненте анемии, в а случае превышения двойки - показывает вероятность повышенного образования эритроцитов.

> Подсчет ретикулоцитов

Данная информация не может использоваться при самолечении!
Обязательно необходима консультация со специалистом!

Для чего нужен подсчет ретикулоцитов?

Подсчет ретикулоцитов - это лабораторное исследование крови, которое позволяет оценить эффективность эритропоэза. Эритропоэзом называется процесс образования эритроцитов в костном мозге. А ретикулоциты - это клетки крови, которые являются переходной формой между предшественниками красных кровяных телец, образующимися в костном мозге, и эритроцитами, циркулирующими в кровяном русле. Их количество показывает, насколько интенсивно происходит процесс кроветворения.

В каких случаях производят подсчет эритроцитов?

Необходимость в подсчете ретикулоцитов возникает, когда в клиническом анализе крови обнаруживаются признаки анемии или нарушения эритропоэза: снижение или повышение количества эритроцитов или концентрации гемоглобина, появление эритроцитов ненормальных размеров или формы и пр. Исследование помогает диагностировать вид анемии и контролировать процесс ее лечения. Подсчет ретикулоцитов также проводится для мониторинга эффективности химио- и лучевой терапии при опухолях костного мозга.

Кто может назначить анализ и где его можно сделать?

Анализ может назначить терапевт, педиатр, гематолог, инфекционист, хирург или гинеколог. Его делают в государственных поликлиниках и частных медицинских центрах, осуществляющих забор крови для лабораторного исследования. Для подсчета ретикулоцитов берут кровь из пальца или из вены и исследуют ее под микроскопом или с помощью гематологического анализатора. Результат анализа бывает готов на следующий день.

Как подготовиться к исследованию?

На результат анализа могут повлиять некоторые нестероидные противовоспалительные средства, антибиотики группы фторхинолонового и тетрациклинового ряда, производные нитрофурана, транквилизаторы, тиреостатики и другие лекарственные препараты. Поэтому за сутки до исследования желательно прекратить прием лекарств, предварительно согласовав их однодневную отмену с врачом. За 2–3 часа до забора крови желательно не есть и не курить. Можно пить чистую воду без газа.

Какое количество ретикулоцитов считается нормальным?

В абсолютных значениях число ретикулоцитов у женщин должно быть 17–63,8 х 10^9/л, у мужчин оно варьирует от 23 до 70 х 10^9/л. В процентном отношении ретикулоциты составляют от 0,5 до 1,9 % от общего числа эритроцитов. Самое большое количество незрелых эритроцитов отмечается у новорожденных детей (по разным данным от 5 до 15 %). С возрастом их количество постепенно уменьшается. Увеличение числа ретикулоцитов отмечается у беременных, курильщиков и альпинистов.

О каких заболеваниях могут говорить отклонения от нормы?

Повышение количества ретикулоцитов называется ретикулоцитозом, снижение - ретикулоцитопенией. Сам по себе уровень ретикулоцитов не является основанием для постановки какого-либо диагноза, но позволяет врачу более верно предположить, какой патологический процесс происходит в организме.

Уменьшение числа ретикулоцитов или даже полное их отсутствие наблюдается при разных видах анемии (гипопластической, апластической, сидеробластной, вызванной недостатком железа, фолиевой кислоты, витамина B12), при метастазах опухоли в кость, при лечении цитостатиками, лучевой болезни и лучевой терапии.

Причинами ретикулоцитоза могут являться гемолитическая анемия (в этом случае число ретикулоцитов достигает 60 и более процентов), острая кровопотеря (на 3–4 сутки после нее возникает ретикулоцитарный криз), малярия, полицитемия, антианемическое лечение, острый недостаток кислорода. Повышенное количество ретикулоцитов может свидетельствовать о скрытом кровотечении (например, у людей с язвенной болезнью).

Определение количества ретикулоцитов – клинический анализ крови, при котором осуществляется подсчет молодых эритроцитов, производимых костным мозгом. Исследование дополняет общий анализ крови. Подсчет ретикулоцитов выполняется для дифференциальной диагностики различных типов анемий, оценки функционирования костного мозга и селезенки, мониторинга состояний пациентов с железодефицитом, дефицитом витамина В12 или фолиевой кислоты, почечной недостаточностью, онкологическими заболеваниями. Забор крови для исследования производится из вены или капилляров. Показатель ретикулоцитов определяется при помощи метода проточной цитофлуориметрии. Референсные значения для мужчин – 23-70 тыс/мкл, для женщин – 17-63,8 тыс/мкл. Сроки выполнения анализа не превышают 1 рабочего дня.

Ретикулоциты – предшественники эритроцитов. Они производятся костным мозгом при дифференцировке и делении стволовых клеток. Большая часть ретикулоцитов находится в костном мозге, в кровоток в основном попадают уже зрелые эритроциты. Доля ретикулоцитов в крови – около 0,5-2%. При выполнении анализа определяется количество клеток этого типа и их процент от общего числа эритроцитов. Результаты позволяют оценить производство красных кровяных клеток в костном мозге, выявить степень активности этого процесса.

Организмом поддерживается стабильный уровень эритроцитов в крови. При снижении их количества в результате гемолиза, нарушения синтеза, кровотечения включаются компенсаторные механизмы восстановления нормальной концентрации. По изменению уровня и процента ретикулоцитов можно установить усиление производства красных кровяных клеток в костном мозге или угнетение этого процесса. Если костный мозг функционирует нормально, то потеря эритроцитов приводит к последующему увеличению их количества и количества ретикулоцитов. Понижение уровня этих типов клеток происходит при поражении красного костного мозга опухолью, метастазами, лучевой терапией и химиотерапией. Для проведения анализа на ретикулоциты биоматериалом является капиллярная или венозная кровь. Исследование выполняется с помощью гематологического анализатора методом проточной цитометрии. Результаты применяются в общетерапевтической практике, в гематологии, педиатрии, инфекционистике, хирургии.

Показания

Анализ на ретикулоциты используется для оценки производства эритроцитов костным мозгом. Результаты исследования позволяют дифференцировать различные виды анемий. По уровню ретикулоцитов они подразделяются на гипорегенераторные и регенераторные. В первом случае показатели теста снижены, производство эритроцитов недостаточное, функции костного мозга угнетены. К этой группе относятся гемолитические анемии при хронических заболеваниях, общей интоксикации, кахексии, дефиците белков, железа, витаминов. Регенераторные анемии сопровождаются компенсаторным повышением уровня ретикулоцитов на фоне усиленного разрушения или потери эритроцитов. К этой группе относятся постгеморрагические и некоторые гемолитические анемии. Анализ на ретикулоциты может использоваться для установления тяжести анемии, тогда его результаты дополняются показателями уровня эритроцитов, гемоглобина и эритроцитарными индексами.

Определение уровня ретикулоцитов показано при сниженном уровне эритроцитов, гемоглобина, при жалобах на частую усталость, головные боли, одышку, кровь в моче или стуле. При установленном диагнозе анемии анализ назначается с целью оценки эффективности лечения. Особенно часто он используется для мониторинга анемий, вызванных дефицитом железа, витамина B12 или фолиевой кислоты, а также развивающихся на фоне почечной недостаточности, хронических заболеваний. Для исследования функции костного мозга тест на ретикулоциты показан при повышенном уровне эритроцитов, для определения причины полицитемии.

Анализ на ретикулоциты в крови не используется для установления диагноза. Его основное назначение в клинической практике – составление плана дальнейших диагностических процедур и контроль успешности терапии. Количество ретикулоцитов в крови относительно стабильно, поэтому при снижении уровня эритроцитов и гематокрита показатели анализа становятся искусственно завышенными. Избежать этого помогает расчет ретикулоцитарного индекса – абсолютного числа ретикулоцитов (процент ретикулоцитов умноженный на показатель гематокрита). Еще одной особенностью данного исследования является то, что результаты указывают на недавнюю активность костного мозга, так как незрелые эритроциты циркулируют в крови в течение 2 дней.

Подготовка к анализу и забор материала

Кровь для анализа на ретикулоциты рекомендуется сдавать с утра, натощак. Минимальный промежуток между приемом пищи и процедурой – 3-4 часа. Не менее чем за сутки необходимо отказаться от интенсивных физических нагрузок, употребления алкоголя, избегать воздействия стрессовых факторов. При назначении анализа стоит сообщить врачу об используемых лекарствах, так как некоторые препараты влияют на уровень ретикулоцитов в крови. За 30 минут до процедуры забора нужно отказаться от курения, исключить физическое и эмоциональное напряжение.

Уровень ретикулоцитов определяется в капиллярной или венозной крови. Соответственно забор производится из безымянного пальца или из локтевой вены. Кровь помещается в пробирку с антикоагулянтом и направляется в лабораторию. В настоящее время для подсчета ретикулоцитов практически везде используются гематологические анализаторы. Исследование выполняется методом проточной цитометрии – клетки в потоке жидкости перемещаются через очень узкий капилляр и учитываются при облучении лазером. Сроки исполнения анализа – 1 день.

Нормальные значения

В результатах анализа на ретикулоциты отображается абсолютное число клеток в единице объема крови и процент от общего количества эритроцитов. В норме у пациентов женского пола уровень ретикулоцитов составляет от 17*109 до 63,8*109 клеток/л, у пациентов мужского пола – от 23*109 до 70*109 клеток/л. Доля клеток этого типа в общем количестве эритроцитов изменяется с возрастом:

  • с рождения до 2 недель – от 0,15 до 1,5%;
  • с 2 недель до 1 месяца – от 0,45 до 1,4%;
  • с 2 до 6 месяцев – от 0,25 до 0,9%;
  • с 6 месяцев до 2 лет – от 0,2 до 1%;
  • с 2 до 6 лет – от 0,2 до 0,7%;
  • с 6 до 12 лет – от 0,2 до 1,3%;
  • с 12 до 18 лет – от 0,12 до 2,05% для девушек, от 0,24 до 1,7% для юношей;
  • с 18 лет – от 0,59 до 2,07% для женщин, от 0,67 до 1,92% для мужчин.

Физиологическое повышение уровня ретикулоцитов в крови происходит при кислородном голодании, вызванном подъемом на большую высоту или спуском под воду, длительным пребыванием в непроветриваемом помещении, курением, приемом алкоголя. Кроме этого, увеличение концентрации данных клеток иногда определяется у беременных и рассматривается как вариант нормы.

Повышение уровня

Причиной повышения уровня ретикулоцитов в крови может быть кровотечение. Концентрация эритроцитов снижается, чтобы ее восстановить, костный мозг увеличивает продукцию их предшественников. При остром кровотечении количество ретикулоцитов возрастает на 3 или 4 день, при хроническом – остается стойко повышенным все время. При заболеваниях сопровождающихся гемолизом (разрушением эритроцитов) показатель ретикулоцитов значительно превышает норму, иногда отклонения достигают 300%. Наиболее распространенные патологии этой группы – наследственные дефекты эритроцитов, их аутоиммунное разрушение, токсическое поражение при малярии. Другими причинами повышения уровня ретикулоцитов могут быть полицитемии, воспалительные процессы, рак костного мозга или распространение метастазов в него, восстановление функций костного мозга после лучевой и химиотерапии. При лечении анемий нормализация концентрации ретикулоцитов свидетельствует об успешности терапевтических мероприятий.

Снижение уровня

Причиной снижения уровня ретикулоцитов в крови могут быть анемии, вызванные дефицитом железа, витамина B12 или фолиевой кислоты. В таких случаях производство клеток крови сокращается из-за недостатка «строительного материала». Другой причиной снижения уровня ретикулоцитов являются анемии, развивающиеся на фоне поражений костного мозга или угнетения его функций. Изменения такого типа определяются при алкогольной интоксикации, снижении активности щитовидной железы, хронических инфекциях, аутоиммунных патологиях, заболеваниях почек, воздействии токсических веществ, в том числе лекарственных препаратов, облучении.

Лечение отклонений от нормы

В клинической практике тест на ретикулоциты чаще всего назначается после общего анализа крови при снижении показателей эритроцитов и гемоглобина. Уровень ретикулоцитов позволяет оценить функции костного мозга, синтез эритроцитов, определить тип анемии, отслеживать эффективность ее лечения. Если результаты исследования отклоняются от нормальных, стоит обратиться за консультацией к лечащему врачу – терапевту, педиатру, гематологу, хирургу. Чтобы предупредить влияние физиологических факторов на количество ретикулоцитов, необходимо исключить ситуации, вызывающие кислородное голодание – подъемы на высоту или спуски под воду, длительное пребывание в загазованном или душном помещении, курение, употребление алкоголя.

Отзывы размещенные на данном сайте являются личным мнением лиц их написавших. Не занимайтесь самолечением!

Ретикулоциты (клиническое значение и лабораторная диагностика)

(1) ретикулоциты, имеющие ядро (эритронормобласты), причем зернистость у них располагается в виде плотного венчика вокруг ядра;

(2) ретикулоциты, имеющие зернисто-сетчатую субстанцию в виде клубка или глыбки;

(3) ретикулоциты, имеющие зернистость в виде густой сети;

(4) ретикулоцитов, имеющие зернисто-сетчатую субстанцию в виде отдельных нитей;

(5) ретикулоциты, содержащие отдельные зернышки.

При гемолитических анемиях (число ретикулоцитов может доходить до 60% и более (особенно сильно увеличиваясь при гемолитических кризах);

При острых кровопотерях (на 3 – 5 сутки после кровопотери возникает ретикулоцитарный криз), в том числе, увеличение ретикулоцитов позволяет заподозрить скрытое кровотечение (например, у больных язвенной болезнью желудочно-кишечного тракта, брюшным тифом);

При лечении железом железодефицитных анемий (через несколько дней (3 - 10) после начала антианемического лечения пернициозной анемии);

При остром недостатке кислорода;

При метастазах опухолей в костный мозг.

Аномальной формы гемоглобина;

При арегенераторных апластических и гипопластических анемиях;

При анемиях, вызванных недостаточностью содержания железа, витамина B12, фолиевой кислоты (микроцитарно-гипохромные и мегалобластные анемии);

При сидеробластной анемии;

При метастазах рака в кость;

При лучевой болезни и лучевой терапии;

При лечении цитостатиками;

При аутоиммунных заболеваниях системы кроветворения;

При заболеваниях почек;

При рецидиве анемии Аддисона-Бирмера;

Неправильный выбор антикоагулянта или недостаточное перемешивание крови с антикоагулянтом;

Длительное сдавливание руки жгутом;

Прием сульфаниламидов (возможны как заниженные, так и завышенные результаты);

Переливание крови незадолго до исследования;

Гемолиз пробы крови.

Оценка активности эритропоэза при состояниях, сопровождающихся гемолизом или кровопотерей;

Ценка способности костного мозга к регенерации после цитотоксической терапии и трансплантации костного мозга;

Ценка восстановления синтеза эритропоэтина после трансплантации почки;

Допинговый контроль у спортсменов (прием эритропоэтина);

Диагностика неэффективного гемопоэза или снижения продукции эритроцитов;

Дифференциальная диагностика анемий;

Детекция нарушения регенераторной способности костного мозга при дефиците железа, витаминов B12, B6, фолатов, меди и мониторинга соответствующей терапии;

Оценка реакции на терапию эритропоэтином, эритросупрессорами.

Ретикулоциты с низким содержанием РНК, наиболее зрелые (LFR%, low fluorescence reticulocyte fractions, фракция ретикулоцитов с низкой флуоресценцией);

Ретикулоциты со средним содержанием РНК (MFR%, medium fluorescence reticulocyte fractions) - фракция ретикулоцитов со средней флуоресценцией);

Ретикулоциты с высоким содержанием РНК (HFR%, high fluorescence reticulocyte fractions) - фракция ретикулоцитов с высокой флуоресценцией);

Незрелая фракция ретикулоцитов (IRF%, Immature Reticulocyte Fraction).

Что показывают ретикулоциты в анализе крови

Ретикулоциты являются предшественниками красных кровяных телец с остатками рибонуклеиновых кислот (РНК). Они циркулируют в периферической крови в небольшом количестве. Образуются эти клетки из нормобластов в костном мозге, где находятся около двух дней. Затем незрелые эритроциты попадают в кровь. Под воздействием гормона эритропоэтина, который вырабатывается почками и выбрасывается в кровь, они становятся зрелыми эритроцитами. Это процесс занимает примерно два дня.

При ускорении образования красных клеток количество ретикулоцитов в крови растет, при замедлении – уменьшается. Механизм увеличения ретикулоцитов таков, что при усиленном разрушении эритроцитов их уровень может резко возрасти и составить половину всех красных клеток. Кроме того, в крови могут появиться предшественники ретикулоцитов – нормобласты.

Таким образом, активность этих клеток показывает, с какой скоростью в костном мозге идет образование эритроцитов. Фракция ретикулоцитов в крови отражает свойства костного мозга, в частности его регенеративные способности.

Что собой представляют и какие функции выполняют

Это безъядерные клетки розоватого цвета с синеватым отливом. При микроскопическом исследовании в них видны внутриклеточные структуры, которых нет у эритроцитов. Это нитевидные и гранулярные образования: митохондрии, остатки РНК, другие органеллы.

Ретикулоциты выполняют те же функции, что и эритроциты, то есть переносят кислород, но менее эффективно.

Норма

Норма ретикулоцитов изменяется с возрастом: у грудных детей их уровень выше, чем у взрослого человека. После 12 лет их количество зависит от пола. Это связано с началом менструаций у девочек и ежемесячными потерями крови.

Этот показатель в общем анализе крови измеряется в процентах от общего числа красных клеток (обозначение - RTC). Нормы ретикулоцитов представлены в таблице:

Ретикулоциты

Внимание! Ретикулоцитоз при отсутствии анемии указывает на скрытые, но хорошо компенсированные кровопотери.

Что показывают ретикулоциты и какое у них обозначение в анализе крови

Клетки ретикулоциты при здоровом состоянии организма человека, присутствуют в малых количествах. Основной процент ретикулоцитов в костном мозге человека преобразуются в эритроциты. Весь этот процесс превращения занимает не более 2 дней. Регулирует это преобразование гормон эритропоэтин.

В анализах ретикулоцит обозначается транскрипцией RTC, на латинском языке - Reticulocytes.

RTC (ретикулоциты) выявляет работу костного мозга, а также отмечает уровень выработки в нем эритроцитов. Нормобласты также преобразовываются в эритроциты.

Что это такое ретикулоциты и какую функцию в организме они выполняют?

Это клетки, не имеющие ядра синеватого или розового оттенка. Для ретикулоцитов есть ярко выраженные внутриклеточные структуры, что отличает их от эритроцитов.

Данные образования - это остатки клетки РНК, митохондрий и выглядят в виде нитей или же гранул. Чем больше растет в крови показатель красных тел, тем выше уровень ретикулоцитов.

И наоборот - чем меньше образовывается красных тел, тем ниже уровень этих молекул.

Предшественники эритроцитов (ретикулоциты)

Они начинают свой процесс образования из клеток нормобластов, и по истечении 48 часов эти молекулы становятся эритроцитами (незрелыми) и попадают в кровь.

Под воздействием гормона (эритропоэтин), который вырабатывается в организме при помощи почек, эритроциты из незрелых преобразовываются в зрелые эритроциты.

При активной выработке эритроцитов в крови могут быть обнаружены нормобласты, которые есть молекулярными предшественниками клеток RTC.

Функции ретикулоцитов, как и эритроцитов - это перенос кислорода.

Какая норма для детского и взрослого возраста?

Показатель уровня ретикулоцитов в крови человека меняется в зависимости от возраста. У новорожденных детей уровень значительно выше, чем показатель у взрослого человека.

До 12 лет коэффициент ретикулоцитов у мальчиков такой же, как и у девочек.

По мере взросления девочек и с моментом наступления у них менструального цикла, появляются различия в уровне ретикулоцита. Это связано с потерей объема крови при менструальном цикле.

У взрослых мужчин показатели нормы в промилле, а у представительниц прекрасного пола. RTC при исследовании анализов измеряют в процентах к наличию в крови эритроцитов.

В таблице отмечены показатели нормы в процентном соотношении и в промилле:

В каких случаях назначают диагностику крови?

Анализ на ретикулоциты назначают в случаях:

  • При контроле лечения заболевания анемии и применения препаратов (содержащие железо и медикаменты, в состав которых входит фолиевая кислота и витамин группы В12;)
  • При оперативном вмешательстве и трансплантации костного мозга;
  • Если существует подозрение на разрушение клеток эритроцитов;
  • Для контроля эффективности терапии системы кроветворения;
  • После потери большого объема крови;
  • Кровотечение во внутренних жизненно важных органах;
  • При лечении укуса ядовитой змеи и болезни малярия;
  • При трансплантации органа почки;
  • Контроль над приемом медикаментозного препарата эритропоэтин;
  • При онкологических заболеваниях;
  • Метастазы в клетках костного мозга онкольного.

Как проходит диагностическое исследование?

Анализ на наличие ретикулоцитов не является специальным исследованием крови, а входит в общий анализ крови.

Только если появилась острая необходимость провести специализированное исследование состава крови на ретикулоциты, тогда проводится дополнительная диагностика.

Суть этого метода диагностики заключается в том, чтобы выявить клетки, имеющие зернистую субстанцию и которая окрашивается при помощи специальных красителей.

Определяется данная субстанция по мазку крови. Для проведения этого анализа кровь берется из пальца.

Существует несколько способов проведения исследования:

  • На лабораторном стекле;
  • В лабораторной пробирке.

Способ анализа, на стекле широко применяемый метод в лабораториях Инвитро, хотя и этот метод не достаточно точный.

Для данного анализа необходимо применять специальный краситель, лабораторное стекло, микроскоп. Этот способ проверки наименее затратный и наиболее доступный метод.

Стекло необходимо вымыть и хорошо высушить при использовании горелки. На теплую поверхность нужно нанести краситель и сделать из него мазок на стекле. После этого нанести каплю крови на этом мазке и также сделать из нее мазок. Поместить стекло с мазком на 10 минут во влажную среду, а после этого просушить на воздухе.

Способ исследования в пробирке. Эта методика немного отличается от методики анализа на стекле. Суть данной методики в том, что необходимо в пробирку поместить краситель, а потом в нее добавить каплю крови и перемешать. Этот состав должен постоять от 20 минут до 180 минут. После этого повторно перемешать и только после этого наносить мазки.

Также проводится диагностика методом автоматизированного анализа. Данная методика намного сложнее, чем предыдущая методика, но она позволяет более точно исследовать кровь. Для этой методики применяется только венозная кровь и не позднее, чем через 10 часов после забора. По данному способу выясняют ретикулоциты низкой флюоресценции - LFR, средней - MFR и сильной флюоресценции - HFR.

Подсчет уровня ретикулоцитов в составе крови

Мазки, которые прошли всю процедуру высушивания, исследуют при помощи микроскопа. Эритроциты так же как и ретикулоциты имеют зернистую структуру.

  • Желтого цвета и зеленоватого оттенка;
  • Ретикулоциты имеют синий цвет и фиолетовый или розовый оттенок.

Подсчет количества клеток считается в промилле или же в процентном соотношении к 1000 эритроцитам. Если в мазке крови выявлены ретикулы в количестве 17 клеток, тогда подсчет такой - это 17 промилле или же 1,7%.

Готовые мазки исследуют под микроскопом. Эритроциты и ретикулоциты имеют желтовато-зеленоватую окраску, зернистая структура ретикулоцитов синего или синевато-фиолетового цвета. Посчитанные клетки выражают в промилле или в процентах.

Целесообразно при заболевании анемия применять «ретикулоцитарный индекс продукции», в котором указывается гематокрит и число суток, для того чтобы ретикулоциты поступили в кровь.

Повышенный уровень ретикулоцитов в крови что это значит?

У новорожденного ребенка ретикулоциты повышены и соответствует 5% - 10%. Этот коэффициент является нормой для такого возраста ребенка и это связано с тем, что малыш адаптируется к влиянию внешней среды.

По мере взросления у детей показатель снижается до нормативного соответствия.

У взрослых повышение ретикулоцитов происходит вследствие заболевания - ретикулоцитоз. Этот процесс происходит от того, что в крови присутствует недостаток эритроцитов и костный мозг восполняет эти клетки выработкой ретикулоцитов, которые не позднее, чем через 48 часов синтезируются в эритроциты.

Если человек здоров, тогда эритроциты в его крови живут 120 календарных дней, что позволяет костному мозгу своевременно пополнять их уровень.

Повышенные ретикулоциты в составе крови могут иметь, как позитивное влияние на организм, так и негативное влияние на человека.

Ретикулоциты

Ретикулоциты- молодые эритроциты, обра­зующиеся после потери нормобластами ядер. Характерной особенностью ретикулоцитов явля­ется наличие в цитоплазме зернисто-нитчатой субстанции, представляющей агрегированные рибосомы и митохондрии. Эта субстанция выяв­ляется при специальном методе окраски - суправитальном (прижизненная), т. е. без предварительной фикса­ции клеток. Зернисто-нитчатая субстанция в различных ретикулоцитах отличается полимор­физмом; чем клетка моложе, тем субстанция более обильная. У самых молодых ретикуло­цитов она имеет форму густого клубка, у более зрелых клеток выявляется в виде сеточки, от­дельных нитей и затем отдельных зерен. В маз­ках, окрашенных обычными гематологическими методами, ретикулоциты серовато-розового цве­та - полихроматофильны, т. е. окрашены раз­ными красителями.

Определение количества ретикулоцитов про­изводится при микроскопии специально окра­шенных мазков

3.2.1 Методика окраски мазков крови на ретикулоциты по Алексееву (подсчет по Фонио)

Принцип: Метод основан на подсчете числа ретикулоцитов в окрашенных мазках крови на 1000 эритроцитов. Готовят одновременно 2 мазка (на тромбоциты и ретикулоциты).

Реактив:рабочий раствор краски по Алексееву

Ход определения: В капилляр для определения СОЭ набирают рабочий раствор до метки 0,75 мкл, и полный капилляр крови из прокола пальца больного. Соотношение красителя к крови составляет 1:4. Смесь оставляют на 2 часа, затем делают тонкий мазок на предметном стекле. Мазок высушивают на воздухе и микроскопируют с иммерсией.

Подсчет производят следующим образом: сетки ретикулоцитов окрашиваются в синий цвет. Во время подсчета эритроцитов в поле зрения считают количество ретикулоцитов. Подсчитывают 1000 эритроцитов. Результат выражают в процентах.

Нормативная величина:В крови здорового человека содержится 0,2-1,0 %

(или 2-10 даже допускается до 12 проммиль) ретикулоцитов

Клинико-диагностическое значение:Появление ретикулоцитов в периферической крови указывает на усиленную работу костного мозга и используется при оценке различных видов анемий.

Повышение количества ретикулоцитов наблюдается после кровопотери, при гемолитических анемиях

Резкий ретикулоцитоз - отмечается при гемолитической желтухе

Снижение количества ретикулоцитов при наличии анемии говорит об апластическом типе кроветворения.

По уровню ретикулоцитов в крови анемии подразделяются на:

Регенераторные(количество ретикулоцитов 0,5-5 %- это постгеморрагические анемии);

Гиперрегенераторные(количество ретикулоцитов более 5% - это гемолитические анемии);

Гипо - и арегенераторные(количество ретикулоцитов снижено или они отсутствуют, несмотря на тяжелое течение анемии- гипо - и апластические, железо- и. В 12- дефицитные анемии).

Подсчет ретикулоцитов в мазке после окраски их специальными красителями

Подсчет ретикулоцитов в мазке после окраски их специальными красителями является на практике наиболее используемым методом подсчета количества ретикулоцитов. Это связано с тем, что метод простой, достаточно дешевый и не требует специального дорогостоящего оборудования, в связи с чем может применяться в любой клинико-диагностической лаборатории.

Принцип метода

Выявление зернисто-сетчатой субстанции ретикулоцитов при суправитальной окраске щелочными красками с дальнейшим подсчетом их в мазке крови.

Реактивы

Можно использовать один из следующих красителей:

  1. Насыщенный раствор бриллиантового крезилового синего в абсолютном спирте (для приготовления абсолютного спирта надо выдержать 96% этанол в нескольких сменах прокаленного порошка медного купороса). На 100 мл абсолютного спирта берут 1,2 г краски.
  2. Раствор азура I: азур I – 1 г, аммония оксалат – 0,4 г, натрия хлорид – 0,8 г, этиловый спирт 96% - 10 мл, дистиллированная вода – 90 мл. Раствор краски в закрытом флаконе помещают на 2 – 3 дня в термостат при 37° C и периодически энергично взбалтывают. Затем охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через бумажный фильтр. Раствор сохраняют в посуде из темного стекла. При появлении осадка краску следует снова профильтровать.
  3. Раствор азура II: азур II – 1 г, натрия цитрат – 5 г, натрия хлорид – 0,4 г, дистиллированная вода – 45 мл. Раствор оставляют в термостат при 37° C на 2 суток, периодически помешивая. Для ускорения растворения краску можно прогреть на слабом огне в течение 15 – 20 мин, не доводя до кипения. Охлаждают до комнатной температуры и фильтруют. Хранят в посуде из темного стекла.

Специальное оборудование

Ход определения

Окраску ретикулоцитов проводят либо на стекле, либо в пробирке.

Окраска ретикулоцитов на стекле

При окраске ретикулоцитов на стекле хорошо вымытое и обезжиренное предметное стекло подогревают над пламенем горелки. Стеклянной палочкой наносят на стекло каплю одного из перечисленных выше красителей и готовят мазок из краски шлифованным стеклом. Стеклографом маркируют сторону стекла, на которую нанесен мазок краски. В таком виде стекла можно заготовить впрок и хранить в сухом темном месте. Перед проведением анализа готовят влажную камеру. Обычно для этого пользуются чашкой Петри с уложенными по краям валиками смоченной ваты или фильтровальной бумаги. Наносят каплю крови на мазок краски, готовят из нее тонкий мазок и тотчас помещают во влажную камеру на 3 – 10 мин. Затем высушивают мазки на воздухе.

Окраска ретикулоцитов в пробирке

Окраска ретикулоцитов в пробирке отличается при использовании разных красителей.

Метод 1 – окраска ретикулоцитов в пробирке бриллиантовым крезиловым синим.

Перед употреблением готовят в пробирке рабочий раствор бриллиантового крезилового синего из расчета на каплю 1% раствора оксалата калия 4 капли раствора краски бриллиантового крезилового синего. В краску добавляют 0,04 мл крови (две пипетки до метки 0,02). Смесь тщательно, но осторожно перемешивают и оставляют на 30 минут. Затем снова перемешивают и готовят тонкие мазки.

Метод 2 - окраска ретикулоцитов в пробирке азуром II.

В пробирку помещают 0,05 мл раствора краски азур II и 0,2 мл крови. Смесь тщательно перемешивают и оставляют на 20 – 30 минут. Снова перемешивают и готовят тонкие мазки.

Метод 3 - окраска ретикулоцитов в пробирке азуром I.

В пробирку помещают 0,3 – 0,5 мл раствора краски азур I и 5 – 6 капель крови пипеткой от аппарата Панченкова. Пробирку закрывают резиновой пробкой, смесь тщательно, но осторожно перемешивают и оставляют на 1 – 1,5 часа (ретикулоциты окрашиваются лучше при экспозиции 1,5 – 3 часа). Перемешивают и готовят тонкие мазки.

В настоящее время в продаже имеются готовые красители для ретикулоцитов заводского изготовления. Окраска ретикулоцитов с их помощью производится согласно прилагаемой инструкции.

Подсчет ретикулоцитов.

Приготовленные одним из указанных выше способов мазки микроскопируют с иммерсионным объективом. В мазке ретикулоциты и эритроциты окрашены в желтовато-зеленоватый цвет, зернисто-нитчатая субстанция в ретикулоцитах – в синий (при окраске азуром II и бриллиантовым крезиловым синим) или синевато-фиолетовый цвет (при окраске азуром I).

Фотографии ретикулоцитов:

Находят поля зрения, где эритроциты располагаются раздельно. В этих полях зрения необходимо подсчитать не менее 1000 эритроцитов и отметить среди них количество эритроцитов, содержащих зернисто-нитчатую субстанцию. Большая точность получается при подсчете на 2000 – 3000 эритроцитов.

В связи с тем, что в поле зрения располагается большое количество эритроцитов, что затрудняет подсчет, необходимо ограничить (уменьшить) поле зрения. Для этого можно воспользоваться либо специальным окуляром, в котором можно уменьшить поле зрения до требуемых размеров, либо воспользоваться специальным «окошком» (из бумаги вырезают круг диаметром несколько меньше окуляра, в центре круга вырезают небольшой ромбик и вставляют полученное окошко в окуляр).

Количество подсчитанных ретикулоцитов выражают на 100 (в процентах) или на 1000 (в промилле) эритроцитов.

Пример: При подсчете в мазке 1000 эритроцитов выявлено, что 15 эритроцитов из 1000 имеют зернисто-сетчатую субстанцию той или иной степени, то есть являются ретикулоцитами. Следовательно, количество ретикулоцитов в данном случае составляет 1,5% или 15‰.

Литература:

  • Справочник "Лабораторные методы исследования в клинике" под редакцией Меньшикова В. В. - Москва, "Медицина", 1987 г
  • Любина А. Я., Ильичева Л. П. и соавторы - "Клинические лабораторные исследования" - Москва, "Медицина", 1984 г.

Подсчет количества ретикулоцитов при помощи люминесцентной микроскопии

Метод подсчета количества ретикулоцитов при помощи люминесцентной микроскопии отличается простотой и требует немного времени, более точен по сравнению с обычным методом, так как при люминесцентной микроскопии обнаруживаются мельчайшие зерна сетчато-нитчатого вещества.

Ретикулоциты

Ретикулоциты – молодые эритроциты, образующиеся после потери нормобластами ядер. Характерной особенностью ретикулоцитов является наличие в их цитоплазме зернисто-нитчатой субстанции (ретикулума), представляющей агрегированные рибосомы и митохондрии.

Патологические включения в эритроцитах

Тельца Жолли (тельца Хауэлла-Жолли) - мелкие круглые фиолетово-красные включения размероммкм, встречаются по 1 (реже по 2 - 3) в одном эритроците. Предсталяют собой остаток ядра после удаления его РЭС. Выявляются при интенсивном гемолизе и "прегрузке" РЭС, после спленэктомии, при мегалобластной анемии..

Цитохимическое исследование липидов

Цитохимическое исследование липидов основано на применении красящих веществ, растворяющихся в жирах (судан III, судан IV, черный судан и др.). Для выявления нейтрального жира пользуются суданом III, окрашивающим жир в оранжевый цвет. Липоиды выявляются лучше суданом черным (черное окрашивание).

Анализ мочи по Нечипоренко

Метод Нечипоренко в отечественной лабораторной диагностике является наиболее распространенным методом количественного определения форменных элементов в моче. Этот метод наиболее прост, доступен любой лаборатории и удобен в амбулаторной практике, а также имеет ряд преимуществ перед другими известными количественными методами исследования осадка мочи. По методу Нечипоренко определяют количество форменных элементов (эритроцитов, лейкоцитов и цилиндров) в 1 мл мочи.

©18 Лабораторная диагностика

Ретикулоциты: что это, нормы для детей и взрослых, высокие и низкие, роль в огранизме

В общем анализе крови нередко можно встретить и такое обозначение клеток, как RET - ретикулоциты. В полном смысле слова клетками они не являются, поскольку не имеют ядра, ровно, как и зрелые эритроциты. Между тем, определение этих форм не входит в перечень обязательных показателей гематологического исследования. Если врачу нужно, он отдельно подчеркивает интересующие его параметры. Разумеется, людям, которым доводилось сдавать подобный анализ, хочется узнать: что это за клетки такие – ретикулоциты, и почему к ним относятся так неоднозначно.

Кто они и сколько их?

Ретикулоциты – «новоиспеченные» эритроциты, только-только покинувшие костный мозг.

Норма ретикулоцитов в периферической крови взрослого человека едва превышает 1% (по данным разных авторов от 0,8 - 1,3 до 0,2 - 2%). У детей только-только появившихся на свет нормой может быть и 10%, но по мере роста и развития малыша показатели начинают снижаться и уже к двум неделям жизни максимально приближаются к нормальным значениям взрослых людей.

Вообще, эритропоэз новорожденных – это отдельная тема: взятый анализ через 12 часов после рождения показывает заметное увеличение уровня гемоглобина (до 200 г/л), эритроцитов (до 6,0 х/л и выше) и ретикулоцитов. Такая картина крови наблюдается несколько дней, затем данные показатели начинают падать, что связано со снижением выработки эритропоэтина. Через две недели – месяц продукция эритропоэтина вновь увеличивается, что приводит к повышению уровня ретикулоцитов и эритропоэз нормализуется (у полугодовалого ребенка нормы уже мало отличаются от взрослых). В этой связи хотелось бы обратить внимание читателя на обозначение единиц измерения количества ретикулоцитов, содержание их может выражаться и в промилле, тогда цифры увеличатся в 10 раз.

Таблица: нормы ретикулоцитов по возрастам

Однако возраст «до года» включает разные, очень ответственные для организма ребенка периоды. Кроме этого, нелишним будет учесть и мнение разных авторов, рассматривающих другие варианты, где нормы у детей расписаны буквально по дням и месяцам и, следовательно, несколько отличаются от предыдущих значений. Есть заметная разница и в нормах взрослых.

Пациенту самому выбирать, которой таблице верить, хотя в разных источниках можно найти еще несколько штук, однако в сомнительных случаях не мешало бы спросить в лаборатории, каким методом производился подсчет (микроскопия или автоматический анализатор) и какие референтные значения использует данная лаборатория.

Почему их так мало и какова их роль?

Родоначальником красных кровяных телец эритроидного ряда является не содержащая гемоглобин, но еще имеющая ядро, как и положено настоящей клетке, клетка – эритробласт, которая в нормальных условиях трансформируется в базофильный эритробласт (пронормобласт, где уже намечаются первые признаки гемоглобинизации (полихроматофильная стадия).

Если с кроветворением все в порядке и условия соответствуют физиологическим, то будущий эритроцит проходит стадии пронормобласта и нормобласта (он представляет собой конечную стадию развития эритроцита, когда в нем еще присутствует ядро). При дальнейшем созревании клетки происходит инволюция ядра и следующий предшественник - полихроматофильный нормоцит, его все-таки теряет, превращаясь в молодой нормоцит, называемый ретикулоцитом. Ретикулоциты ядра уже не имеют, зато содержат гемоглобин и обладают способностью переноса кислорода и углекислого газа.

Ретикулоциты входят в число показателей общего анализа крови, однако их поиском занимаются только в тех случаях, когда возникает необходимость изучения интенсивности эритропоэза . Подсчет количества эритроцитов производится в 1000 эритроцитов и ставит своей задачей определение скорости выработки красных кровяных телец костным мозгом: при ускоренной продукции – количество ретикулоцитов повышается, при угнетении – падает вниз. Резко ускоренный эритропоэз может приводить к тому, что из костного мозга будут выходить в большем, чем нужно, количестве не только ретикулоциты, но и их предшественники – нормобласты. Однако почему же их нельзя посчитать как другие клетки, в ходе клинического анализа крови?

Они требуют отдельной окраски

После потери ядра эритроциты воспринимают только кислые красители, и световая микроскопия не обнаруживает у них никаких внутриклеточных структур, позволяющих отнести форменные элементы к молодым или зрелым видам. Однако найти ретикулоциты можно, применив специальные методы окраски. Суправитальная окраска бриллианткрезиловым синим или акридиновым оранжевым, выявляющая базофильную субстанцию - гранулярные или нитевидные образования, помогает вычленить в мазке из общей массы (1000 клеток) красных кровяных телец молодые формы – ретикулоциты.

Между тем, имея в цитоплазме свойственную ретикулоцитам сетчатую субстанцию, которая определяет название клеток (substantia reticulofilamentosa), не все они «одинаковы с лица», поэтому их разделяют на 5 групп, каждая из которых имеет свои особенности расположения базофильного вещества (БВ):

Короткосрочная «молодость»

В периферической крови здоровых взрослых людей циркулирует не более 1% молодых эритроцитов, которые, в основном, относятся к 4 и 5 группе (83%). Ретикулоцитов 3 и 4 группы значительно меньше, вместе они составляют около 18%, а 1 группа (ядерные клетки) вообще появляются только в случае усиленной регенерации.

Эритроциты пребывают в «молодом возрасте» и называются ретикулоцитами недолго: 30 – 40 часов отведенного срока они не оставляют строму костного мозга, образуя там некоторый резерв красной крови, а после выхода, который регулируется, в основном, гуморально гликопротеиновым гормоном эритропоэтином, 35 – 45 часов свободно путешествуют по кровеносным сосудам. В периферической крови ретикулоциты окончательно прощаются с «юностью» - теряет ретикулум и отправляется выполнять основные функции взрослой клетки, которую, как указывалось выше, клеткой назвать трудно – ядра-то она не имеет («дериваты клеток»).

Нужен подсчет ретикулоцитов!

При определенных обстоятельствах продукция эритроцитов в костном мозге усиливается, следовательно, выход молодых форм в кровяное русло повышается или, наоборот, угнетение кроветворения будет затормаживать выход ретикулоцитов и тогда их количество в крови будет понижено. Попытка оценить эффективность эритропоэза, как правило, начинается с подсчета свежевышедших из костного мозга красных кровяных телец.

Использовать в клиническом анализе обозначение RET заставляют и подозрения об усиленном разрушении эритроцитов в крови (гемолиз). Однако, выясняя причину разрушения клеток, встает вопрос: как костный мозг реагирует на подобные события, старается ли он возместить потери молодыми формами или остается безучастным? Кроме этого, повышенные (или пониженные) молодые эритроциты могут информировать о поведении костного мозга и при других обстоятельствах:

  • Применение лекарственных средств, влияющих на работу главного кроветворного органа (препараты железа, витаминотерапия В 12 и фолиевой кислотой);
  • Лечение эритропоэтином, который, как известно, контролирует выход ретикулоцитов из костного мозга);
  • Состояние костного мозга после трансплантации донорского органа.

Ретикулоциты повышены – что это значит?

Повышенные значения содержания молодых форм в популяции клеток эритроцитарного звена могут свидетельствовать о наличии различных патологических процессов и реакции костного мозга на их присутствие:

  1. Вряд ли кровопотеря, особенно массивная, не заставит интенсивно работать здоровый мозг – ведь убытки нужно как можно скорее восполнять, поэтому количество ретикулоцитов может быть повышено до 10 – 12 % (‰ или 100 – 120 ретикулоцитов на 1000 эритроцитов – 1/10 часть).
  2. Разрушение красных кровяных телец по причине попадания гемолитических ядов или в силу других обстоятельств также не оставит «равнодушным» костный мозг - усиленный распад зрелых эритроцитов всенепременно повысит долю молодых форм (иногда эта доля может достигать 50%).
  3. Не проходит незамеченным и такое серьезное заболевание как гемолитическая анемия, приводящая к повышению RET аж на 300%, то есть, уже не ретикулоциты нужно искать в эритроцитах, а наоборот, поскольку все формы будут молодыми, а взрослые успеют разрушиться.
  4. Сопровождается ретикулоцитозом и другая гематологическая патология (полицитемия, талассемия), а также метастазы в костный мозг неоплазий различной локализации.
  5. Повышены значения ретикулоцитов будут в случае острой гипоксии (кислородное голодание) в силу различных обстоятельств, которые могут преследовать человека от момента рождения до старости.
  6. Причиной повышенных количеств молодых клеток могут стать такие инфекции, как малярия.
  7. Ретикулоцитоз наблюдается при эффективном лечении препаратами железа при ЖДА (через 1-2 недели), возможен скачок до 200% (ретикулоцитарный криз) приблизительно через неделю от начала терапевтических мероприятий в случае В 12 -фолиеводефицитной анемии.

Мало или вовсе отсутствуют

Падение уровня ретикулоцитов наблюдается при угнетении эритроцитарного ростка кроветворения и снижении продукции полноценных эритроцитов по разным причинам, из которых можно выделить:

  • Апластическую анемию, при которой страдают все линии кроветворения;
  • Заболевания почек, тормозящие синтез эритропоэтина, необходимого для регуляции выхода молодых клеток из костного мозга;
  • Аутоиммунные гематологические заболевания;
  • Недостаток витамина В 12 и фолиевой кислоты, который весьма негативно влияет на функцию костного мозга, поскольку нужен для созревания клеток. В данном случае развитие останавливается на уровне эритробласта: клетки больших размеров, ломкие, поэтому не пластичные, не обладающие способностью просачиваться в узкие капилляры (мегалобластная анемия);
  • Алкоголизм (какое уж тут обновление крови?);
  • Микседему;
  • Метастазы новообразований в костную систему.

В заключение

Поиск и подсчет ретикулоцитов производится в 1000 эритроцитов, поэтому относится к общему анализу крови. Если у человека все нормально, то теряется всякий смысл производить отдельную окраску и искать молодые формы, которые в подобных случаях никакой информации не несут. Другое дело, если появляются подозрения, что с эритроцитарной линией что-то не так - тогда данные клетки могут в некоторой степени и прояснить ситуацию.

Между тем, в иных случаях, воспринимая это исследование, как отдельное, люди спрашивают, как подготовиться к анализу, чтобы получить достоверный результат. Традиционно ОАК сдают натощак, для ретикулоцитов и это не принципиально, поэтому можно не беспокоиться. К тому же, если для анализа взята венозная кровь или тест производится автоматическим анализатором высокого класса, то и посещать лабораторию второй раз не придется. Все будет отмечено в общем анализе крови.

Почему могут быть повышены ретикулоциты? Нормальные значения

Ретикулоциты – по сути незрелые эритроциты, вышедшие из костного мозга в кровяное русло. Клетки постоянно циркулируют в крови, но в здоровом организме соотношение их с другими форменными элементами постоянно. Количество ретикулоцитов может изменяться в зависимости от объёма крови и потребности в новых эритроцитах, при опухолях костного мозга и хронических заболеваниях, а также в силу физиологической адаптации. У детей нормальный показатель RET % всегда выше, чем у взрослых.

Что такое ретикулоциты, их виды и функции

Ретикулоциты (принятое обозначение в анализах - RET) – юная форма эртироцитов - не вполне созревшие красные кровяные клетки, но способные переносить кислород. Под микроскопом внутри ретикулоцита видно зернисто-сетчатое образование (лат. retina - сеть), благодаря которому они получили своё название. Данные RET% характеризуют активность костного мозга в отношении производства эритроцитов.

Соответственно степени их зрелости, различают 5 видов (или групп) ретикулоцитов:

  1. Эритронормобласты имеют сформированное ядро и зернистость, окружающую его в виде плотного венчика.
  2. Ядра нет, только зернисто-сетчатое образование.
  3. Субстанция зернистая, напоминающая густую сеть.
  4. Образование в центре клетки напоминает отдельные нити.
  5. Ретикулоциты содержат отдельные зёрнышки.

До 80% от всех ретикулоцитов приходится на группы 4-5. Все ретикулоциты имеют некоторое количество гемоглобина, поэтому их функция – транспортировка кислорода и выведение двуокиси углерода. В нормальных условиях ретикулоцит превращается в зрелый эритроцит примерно за 2 дня.

В норме каждый эритроцит существует примерно 120 дней, затем «постаревшие» клетки поступают в селезёнку, где и заканчивается их путь. Селезёнку, соответственно одной из её функций, называют кладбищем эритроцитов. Организм стремится вернуть равновесие, и под воздействием гормона эритропоэтина (вырабатывается в почках) костный мозг активизируется и вырабатывает новые ретикулоциты. После восполнения адекватного количества эритроцитов почки снижают продукцию эритропоэтина, сдерживая эритропоэз (образование эритроцитов).

Нормы

Нормой считают содержание 0,2 – 1% ретикулоцитов в периферической крови. У новорожденных показатель RET 5-10%, но затем он снижается. У женщин в силу периодических кровопотерь и восстановлений объёмов крови ретикулоцитов больше, чем у мужчин.

Количество RET у здоровых людей стабильно. Если падает общее количество эритроцитов или снижается гематокрит, то процентные данные по ретикулоцитам могут оказаться завышенными. Для адекватной оценки тяжести анемии используют ретикулоцитарный индекс, определяющий абсолютное содержание RET. Расчёт идёт по формуле: RET % х гематокрит/45х1,85. Если индекс менее 2, то подтверждается снижение выработки эритроцитов; индекс более 2-3 говорит о недавно повышенной активности костного мозга.

Узнать причины повышения гематокрита в крови вы можете в этой статье.

Абсолютное количество ретикулоцитов (RET#):

Причины повышения количества ретикулоцитов (ретикулоцитоза)

  1. Гемолиз, разрушение эритроцитов. Возможные причины гемолиза – воздействие гемотоксинов (яд гадюки, токсины при малярии, некоторые лекарственные препараты для лечения эртремии) и аутоиммунные реакции в отношении эритроцитов. В случае массивной гибели эритроцитов показатель RET может превысить норму на 300%.
  2. Кровотечения. Для дифференциальной диагностики используется RET % в динамике: при недавней острой кровопотере количество ретикулоцитов повышается через 3-4 дня, при хронических кровопотерях уровень RET будет стабильно высоким.
  3. Процессы воспаления, опухоли или метастазы в костном мозге повышают RET %.
  4. Период восстановления после лучевой либо химиотерапии.
  5. При лечении анемии препаратами железа RET % повышается на 8-12 день, при назначении адекватных дозировок вит. В12 – на 5-8 день. В обоих случаях ретикулоцитоз – показатель эффективности терапии.
  6. Полицитемии любого генеза (вместе с подъёмом количества гемоглобина и уровня гематокрита).
  7. Приём эритропоэтина для стимуляции костного мозга при анемии.
  8. Приём жаропонижающих лекарств и леводопа.
  9. Курение.
  10. При подъёме на высоту - адаптация к пониженному содержанию кислорода в воздухе.
  11. При беременности.

Ложный ретикулоцитоз (повышение RET только в крови) характерен для раковых опухолей и метастазов в костный мозг.

Для выяснения причины повышения показателя RET проводят дополнительные исследования: изолированные данные большой роли не играют.

Последствия и лечение ретикулоцитоза

Последствиями повышения RET являются: увеличение гематокрита, количества эритроцитов и вязкости крови. Велика опасность развития тромбозов и перекрытия просвета сосудов в головном мозге, сердце, нижних конечностях. Результатом могут стать инфаркт миокарда, ишемический инсульт, тромбоэмболия лёгочной артерии, отмирание мягких тканей ног. Все эти состояния жизнеопасны, нуждаются в срочном лечении.

  • При острых кровопотерях применяют переливание цельной крови либо её компонентов (плазма, эритроцитарная и тромбоцитарная массы). При хронических кровотечениях в желудочно-кишечном тракте, при циррозе печени занимаются терапией основного заболевания либо оперативным лечением.
  • Токсическое воздействие: инфузионная терапия, противоядия. При аутоиммунных реакциях – плазмаферез.
  • Опухоли и метастазы в костный мозг: применяется лучевая и химиотерапия. При полицитемиях – кровопускания, лекарственная терапия, пересадка костного мозга.

Причины понижения количества ретикулоцитов, лечение

Показатель RET снижается, если угнетён эритропоэз – производство эритроцитов, что свидетельствует о нарушении функции костного мозга и состоянии анемии. Основные причины:

  • анемия (железо-, В12- и фолиево-дефицитная);
  • сниженная функция щитовидной железы – микседема;
  • болезни почек, приводящие к снижению производства эритропоэтина;
  • апластическая анемия с постоянно пониженным уровнем ретикулоцитов – опасное для жизни состояние;
  • лучевая или химиотерапия, угнетающие костный мозг;
  • опухоли или метастазы в костный мозг;
  • алкоголизм, приводящий к нарушению работы почек и печени;
  • хронические инфекционные болезни;
  • лекарственные препараты – хлорамфеникол, карбамазепин, сульфаниламиды;
  • уремия – повышение содержания азотистых веществ в крови при почечной недостаточности.

Тактика лечения при снижении количества ретикулоцитов выясняется после диагностики основного заболевания. Вначале применяют симптоматическое лечение, чтобы облегчить состояние пациента – обезболивание, инфузионную детоксикацию, при необходимости – плазмаферез. После постановки окончательного диагноза переходят к этиологическому (воздействие на причину болезни) и патогенетическому (воздействие на механизмы развития заболевания) лечению.

  • оценка количества ретикулоцитов поможет оценить адекватность лечения некоторых видов анемии либо указать на уровень активности эритропоэза;
  • самостоятельного значения для постановки диагноза количество RET не имеет, нужны дополнительные обследования.

Причины повышения ретикулоцитов, как определить функциональности кровеобразующей системы?

Иногда при назначении клинического обследования в общем анализе крови могут отдельно обозначаться RTC либо RЕT – аббревиатуры, которые показывают содержание ретикулоцитов. Они представляют собой безъядерные клетки, предшествующие эритроцитам (красным кровяным клеткам) в процессе их формирования. Ретикулоциты в анализе крови, их количество и соотношение с эритроцитами отражает состояние и репродуктивную функциональность костного мозга, а также всей кроветворной системы.

Медицинская справка

Детально определить, что такое ретикулоциты, можно таким образом: это клетки округлой либо звездчатой формы, которые образуются в костном мозге и трансформируются в эритроциты под воздействие гликопротеинового гормона эритропоэтина.

Окраска ретикулоцитов, как правило, розовая с синим оттенком. Их отличительной особенностью от более поздней формы становится наличие в структуре остаточных РНК, митохондрий и иных органелл, имеющих вид гранулярных и нитевидных формирований, утрата которых и свидетельствует о преобразовании в зрелую клетку.

Функциональные обязанности ретикулоцитов совпадают с эритроцитными – переносить кислород, но с гораздо меньшей эффективностью из-за низкого содержания в них гемоглобина. В основном они концентрируются в красном костном мозге, плоских и трубчатых костях, а в кровь поступают только созревшие красные клетки. Но допускается незначительная фракция незрелых ретикулоцитов и в периферийном кровотоке, что свидетельствует об активации процесса выработки эритроцитов (эритропоэза).

Процесс кровообразования

Эритропоэз начинается с преобразования эритробласта – клетки, содержащей ядро, но не имеющей гемоглобина, в пронормбласт. Далее в эритроидном ряду образуется базофильный эритробласт, который уже имеет задатки гемоглобинизации.

По мере накопления родоначальниками эритроцитов вещества, удерживающего кислород (гемоглобина), клетка проходит этапы полихроматофильного и далее оксифильного нормобласта. В этот период еще сохраняется ядро, инволюция которого приводит к формированию непосредственно молодого эритроцита – ретикулоцита, уже имеющего возможность удерживать и переносить кислород, углекислый газ.

Молодые красные клетки крови пребывают в месте своего образования до 40 часов, после чего небольшая их часть под воздействием эритропоэтина попадает в кровеносные сосуды, где свободно перемещается в течение 1,5 либо 2 суток. За это время клетка теряет ретикулум (остаточные нитевидные формирования) и превращается в эритроцит.

Стадии развития ретикулоцитов

В крови ретикулоциты по мере инволюции ретикулума проходят пять этапов созревания:

  1. нулевая стадия – когда базофильное вещество (сетчатая внутриклеточная субстанция) имеет форму ядра, то есть скопление зернистости выглядит как своеобразный венчик;
  2. первая стадия – базофильное вещество (БВ) приобретает сетчатую структуру в виде клубка;
  3. вторая стадия – зернистая сеть равномерно распределена по клетке;
  4. третья стадия – БВ выглядит как отдельные нити;
  5. четвертая стадия – по периферии клетки БВ распределено в виде мелких зерен.

В здоровом организме ретикулоциты в кровотоке должны встречаться только III и IV стадий созревания (80 процентов), а 0 - II – в единичных экземплярах. Но чрезмерная гибель эритроцитов либо кислородное голодание стимулируют усиленную выработку почками эритропоэтина, что приводит к выбросу в сосуды незрелых клеток всех стадий и даже нормобластов.

Анализ крови на ретикулоциты

Подсчет ретикулоцитов в мазке крови не обязателен при гематологическом исследовании, но относится к общему клиническому анализу. Только при возникновении определенных подозрений у врача делается специальное обозначение в анализе.

Причины исследования

Причины обследования на количество RTC в крови заключаются в необходимости проверить работу костного мозга и почек по производству кровяных клеток и эритропоэтина в таких случаях:

  • при подозрении на анемии различного происхождения;
  • при необходимости контроля медикаментозной терапии дефицита железа, витамина В12 и фолиевой кислоты;
  • для наблюдения при приеме эритропоэтиносодержащих препаратов, эритросупрессоров;
  • при сильных внешних кровотечениях либо подозрении на внутренние;
  • в связи с необходимостью приема препаратов, нейтрализующих токсины в результате укусов ядовитых насекомых или змей;
  • для контроля выработки эритроцитов при пересадке костного мозга либо почки;
  • для определения онкологических заболеваний.

Последний пункт связан с особенностями метастазирования некоторых раковых опухолей в кровеобразующие органы.

Способ выявления

При потере ядра к кровяным клеткам применимы методы окраски только кислыми красителями. Посредством подкрашивания в мазке крови обозначаются элементы эритроидного ряда, которые затем обнаруживаются при помощи световой микроскопии. Для выделения ретикулоцитов из общей массы эритроцитов нужно использовать специальные препараты, меняющие цвет зернистой структуры клеток.

Непосредственно процесс выявления заключается в смешивании кровяной плазмы с бриллиантовым крезиловым синим или акридиновым оранжевым красителем инвитро (в пробирке) либо на стекле в пропорциях: 1 часть крови к 10 частям вещества.

Методы на стекле и инвитро принципиально различаются. В первом случае смешанные мазки крови с красителем на 10 минут опускают во влажную среду, после чего сушат и подсчитываю клетки под микроскопом. Во втором варианте перемешанный в пробирке состав оставляют на срок до 3 часов, затем повторно смешивают, делают мазок и подсчитывают.

Когда звёздчатые клетки ретикулоцитов становятся различимы, и определима степень их зрелости (по структуре подкрашенного БВ) можно получить информацию о состоянии костного мозга.

Допустимые показатели

Нормальный уровень ретикулоцитов соответствует процессу кровообразования в здоровом организме. Для упорядочивания данных используется специальная таблица, в которой нормальные диапазоны градируют по возрасту и половой принадлежности человека.

Норма ретикулоцитов в крови у детей

Ретикулоциты норма у детей варьирует в зависимости от конкретного периода формирования кровеобразующей системы. Так, у новорожденных до 14 дней допустимый показатель составляет от 0,15 до 1,5 процента по отношению к эритроцитам. Нормальные значения для грудничков до двух месяцев – от 0,45 до 2,1 процента, а до полугода – 0,25 – 0,9 процента. У ребенка с шести месяцев до года здоровыми считаются значения от 0,2 до 1 процента, и они стабилизируются вплоть до шестилетнего возраста. Далее диапазон сужается: с 7 до 12 лет он составляет от 0,2 до 1,3 процента.

Ретикулоциты в крови у взрослых

Дальнейшее допустимое содержание ретикулоцитов в крови зависит больше от пола ребенка, чем от возраста, и соответствует взрослым показателям. Это связано с началом менструального цикла у девочек, что подразумевает ежемесячную кровопотерю и, соответственно, увеличение в этот период производства кровяных клеток. Нормативные показатели:

  • допустимым уровнем молодых эритроцитов в крови у женщин и молодых девушек с 13 лет будет от 0,12 до 2,05 процента (от 1,2 до 20 промилле, соответственно);
  • количество ретикулоцитов у мужчин в норме составляет от 0,24 до 1,7 процента в общей эритроидной массе.

Так, у взрослого человека устанавливается постоянный диапазон допустимой концентрации молодых кровяных клеток, которые содержат зернисто-сетчатую субстанцию. При этом повышенные рекулоциты либо ретикулоцитарный криз свидетельствуют об определенных нарушениях в функционировании кроветворной системы.

Повышение ретикулоцитов

Повышенные ретикулоциты (или иначе ретикулоцитоз) могут иметь как позитивное, так и негативное значение для обследуемого. Увеличенное количество незрелых кровяных клеток бывает в случаях:

  • При положительных результатах терапии железосодержащими препаратами, витамином В12 и фолиевой кислотой, которые обычно наступают через неделю.
  • При восполнении объема крови после значительной кровопотери.
  • При положительных результатах лечения онкологических заболеваниях посредством противоопухолевых препаратов либо лучевой терапией.

Важно! Ретикулоцитоз наблюдается при кислородном дефиците на значительной высоте над уровнем моря.

К отрицательным значениям ретикулоцитоза относятся:

  • Последствия таких болезней, как брюшной тиф, которые провоцируют внутренние кровотечения.
  • Ретикулоциты повышены при интоксикации химическими ядами либо инородными агентами.
  • Ложный ретикулоцитоз показывает наличие незрелых клеток в крови при отсутствии их в костном мозге, что свидетельствует о воспалительных процессах либо метастазах в органе.
  • Ретикулоцитоз наблюдается при малярии, гемолитической анемии либо талассемии.

Повышенное содержание незрелых кровяных клеток в крови (ретикулоцитоз) чревато ее загустением, что может впоследствии привести к тромбозу, инфаркту либо инсульту.

Ретикулоциты в крови при беременности

У беременных женщин увеличивается общий объем крови благодаря плазме, поэтому наблюдается ее разжижение и снижение уровня эритроцитов. Из-за того, что в крови содержится недостаточно гемоглобина, развивается анемия, что активизирует процесс эритропоэза. Поэтому у беременных определяется высокий процент содержания ретикулоцитов. Клиника этого явления отвечает норме при физиологической адаптации организма к вынашиванию ребенка.

Ретикулоциты понижены

Ретикулоцитопения (когда уровень ретикулоцитов снижен) зачастую свидетельствует о поражениях почек и/или костного мозга. Факторами, понижающими содержание молодых эритроцитов, становятся:

  • Анемии, вызванные недостатком фолиевой кислоты, витамина В12 либо железа, которые приводят к разрушению эритроцитов.
  • Почечные заболевания, но понизить уровень ретикулоцитов они могут незначительно.
  • Злоупотребление алкоголем, что покажет снижение RTC из-за угнетения почечных функций, подавления работы костного мозга и непосредственного разрушения клеток в результате интоксикации.

Важно! Злокачественные опухоли тоже могут понижать уровень ретикулоцитов в крови. Это зависит от площади костного мозга, в которую метастазировал рак.

Сам по себе показатель содержания ретикулоцитов в крови не является диагнозом. При значительном отклонении от допустимого диапазона он задает общее направление диагностике.

Ретикулоциты - молодые эритроциты, обра­зующиеся после потери нормобластами ядер. Характерной особенностью ретикулоцитов явля­ется наличие в цитоплазме зернисто-нитчатой субстанции, представляющей агрегированные рибосомы и митохондрии. Эта субстанция выяв­ляется при специальном методе окраски - суправитальном (прижизненная), т. е. без предварительной фикса­ции клеток. Зернисто-нитчатая субстанция в различных ретикулоцитах отличается полимор­физмом; чем клетка моложе, тем субстанция более обильная. У самых молодых ретикуло­цитов она имеет форму густого клубка, у более зрелых клеток выявляется в виде сеточки, от­дельных нитей и затем отдельных зерен. В маз­ках, окрашенных обычными гематологическими методами, ретикулоциты серовато-розового цве­та - полихроматофильны, т. е. окрашены раз­ными красителями.

Определение количества ретикулоцитов про­изводится при микроскопии специально окра­шенных мазков

3.2.1 Методика окраски мазков крови на ретикулоциты по Алексееву (подсчет по Фонио)

Принцип: Метод основан на подсчете числа ретикулоцитов в окрашенных мазках крови на 1000 эритроцитов. Готовят одновременно 2 мазка (на тромбоциты и ретикулоциты).

Реактив: рабочий раствор краски по Алексееву

Оборудование: микроскоп

Ход определения: В капилляр для определения СОЭ набирают рабочий раствор до метки 0,75 мкл, и полный капилляр крови из прокола пальца больного. Соотношение красителя к крови составляет 1:4. Смесь оставляют на 2 часа, затем делают тонкий мазок на предметном стекле. Мазок высушивают на воздухе и микроскопируют с иммерсией.

Подсчет производят следующим образом: сетки ретикулоцитов окрашиваются в синий цвет. Во время подсчета эритроцитов в поле зрения считают количество ретикулоцитов. Подсчитывают 1000 эритроцитов. Результат выражают в процентах.

Нормативная величина: В крови здорового человека содержится 0,2-1,0 %

(или 2-10 даже допускается до 12 проммиль) ретикулоцитов

Клинико-диагностическое значение: Появление ретикулоцитов в периферической крови указывает на усиленную работу костного мозга и используется при оценке различных видов анемий.

Повышение количества ретикулоцитов наблюдается после кровопотери, при гемолитических анемиях

Резкий ретикулоцитоз - отмечается при гемолитической желтухе

Снижение количества ретикулоцитов при наличии анемии говорит об апластическом типе кроветворения.

По уровню ретикулоцитов в крови анемии подразделяются на:

- регенераторные (количество ретикулоцитов 0,5-5 %- это постгеморрагические анемии);

- гиперрегенераторные (количество ретикулоцитов более 5% - это гемолитические анемии);

- гипо - и арегенераторные (количество ретикулоцитов снижено или они отсутствуют, несмотря на тяжелое течение анемии- гипо - и апластические, железо- и. В 12- дефицитные анемии).

Внимание! Ретикулоцитоз при отсутствии анемии указывает на скрытые, но хорошо компенсированные кровопотери.



Понравилась статья? Поделитесь ей